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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

豬胰島素原(PI)ELISA試劑盒技術(shù)指導(dǎo)

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

所在地:上海市

更新時(shí)間:2017-12-26

產(chǎn)品簡介:

豬胰島素原(PI)ELISA試劑盒技術(shù)指導(dǎo)用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中豬胰島素原(PI)的含量。

產(chǎn)品特性Product characteristics
品牌BIM供貨周期現(xiàn)貨

豬胰島素原(PI)ELISA試劑盒技術(shù)指導(dǎo)

l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中豬胰島素原(PI)的含量。

l 有效期:6個(gè)月

l 保存條件:2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷

實(shí)驗(yàn)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被豬胰島素原(PI)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豬胰島素原(PI)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。

豬胰島素原(PI)ELISA試劑盒技術(shù)指導(dǎo)主要優(yōu)點(diǎn)

 1.高效、靈敏、特異的抗體;

 2. 穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;

 3. 吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;

 4. 適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;

 5. zui大限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。

常用的使用方法

一、雙抗體夾心法測定抗原

將抗原免疫*種動(dòng)物獲得的抗體吸附于固相表面;

加抗原,形成抗原-抗體復(fù)合物;

加抗原免疫第二種動(dòng)物獲得的抗體,形成抗體抗原抗體復(fù)合物;

加酶標(biāo)抗抗體(第二種動(dòng)物抗體的抗體);

加底物。底物的降解量=抗原量。

二、直接法測定抗原

將抗原吸附在載體表面;

加酶標(biāo)抗體,形成抗原—抗體復(fù)合物;

加底物。底物的降解量=抗原量。

三、間接法測定抗體

將抗原吸附于固相載體表面;

加抗體, 形成抗原-抗體復(fù)合物;

加酶標(biāo)抗體;

加底物。 測定底物的降解量=抗體量。

問題解答

靈敏度是什么意思?

根據(jù)我司多年來的銷售經(jīng)驗(yàn),我司了解到客戶針對購買Elisa試劑盒時(shí),靈敏度要求非常高。這是為什么呢?為您解析Elisa試劑盒靈敏度。Elisa試劑盒靈敏度高能使產(chǎn)品達(dá)到一定的數(shù)值,對產(chǎn)品試驗(yàn)有著非常大利益,它能檢測到的分析物的zui小量,表示檢測下限的能力。

相對靈敏度=真陽性/(真陽性+假陰性)×100%

測定方法及表示方法:靈敏度標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控血清、陽性標(biāo)本稀釋終點(diǎn)、血清盤(pannel)及臨床標(biāo)本陽性率。

靈敏度標(biāo)準(zhǔn)品可以從衛(wèi)生部臨檢中心購買,質(zhì)控血清可以從衛(wèi)生部臨檢中心購買,也可以自己配制。因?yàn)橘|(zhì)控血清不一定是原倍血清,或由于片段、亞型、位點(diǎn)等原因,評定試劑盒的靈敏度都帶有一定的片面性。

陽性標(biāo)本稀釋終點(diǎn)的方法常用于不同試劑盒的比較,但也有上述的片面性。陽性pannel有些可以從衛(wèi)生部臨檢中心購買,如HBsAg陽性pannel,也可以自己配制。臨床標(biāo)本陽性率,是一種粗略的估計(jì),但對臨床很實(shí)用。

注意事項(xiàng)

1. 由于產(chǎn)品底物顯色劑對光及其敏感,因此要避光保存。

2. 檢測吸光度前應(yīng)將酶標(biāo)儀打開,將其預(yù)熱30min以上。

3. 孵育的時(shí)間應(yīng)該嚴(yán)格按照試劑盒說明書上的時(shí)間為準(zhǔn)。

4. 要盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的精密度。

5. 對樣本的結(jié)果有疑問時(shí)需要使用其他檢測方法進(jìn)行驗(yàn)證。

結(jié)果計(jì)算:

在半對數(shù)坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為X軸,相應(yīng)的OD值為Y軸,用四參數(shù)或?qū)?shù)-對數(shù)法繪制zui合適的標(biāo)準(zhǔn)曲線。濃度與OD值成反比關(guān)系,隨著標(biāo)準(zhǔn)品濃度的增加,黃色強(qiáng)度就減少,即OD值減少樣本濃度可直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取。如果樣本實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行了稀釋,則試劑盒zui后結(jié)果應(yīng)乘以相應(yīng)的稀釋因子標(biāo)準(zhǔn)曲線為逆向S型曲線。

附:采用全自動(dòng)酶標(biāo)儀檢測,只需檢測前設(shè)置好酶標(biāo)儀的相關(guān)參數(shù),如坐標(biāo)參數(shù)(線性,半對數(shù))和計(jì)算方式參數(shù)(三次回歸、四參數(shù)或雙對數(shù)曲線方程),即可直接得到結(jié)果。

產(chǎn)品名稱存放:收到貨后貯存于4℃,強(qiáng)烈建議盡快使用配制的試劑1X緩沖液貯存于4℃,將不用的微孔板放回至密封袋內(nèi)密封起來,貯存于4℃,已稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品,生物標(biāo)記物,抗體和HRP貯存于4℃。

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