產品型號：

廠商性質：生產廠家

所在地：上海市

更新時間：2016-07-04

產品簡介：

【產品名稱】：AECA,小鼠抗內皮細胞抗體ELISA試劑盒

【產品用途】：被測樣品定性定量分析

【產品規格】：96T/48T(兩種規格)

【檢測方法】：酶免法/酶聯免疫法(ELISA)

【供 貨 期】：1-3天(現貨供應)

【產品性狀】：液體盒裝

【產品價格】：（ELISA試劑盒含稅含運費，我們全程提供ELISA實驗技術指導和ELISA試劑盒免費代測)

【銷售優勢】：價格行業優勢、質量可靠、如果出現客觀質量問題包換退

【待檢樣本】：體液、血清、血漿、細胞培養上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等

一．實驗原理

ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。
二．試劑盒說明
1. 在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發和污染，試劑避免受到微生物的污染，因為蛋白水解酶的干擾將導致出現錯誤的結果。
2. 小心吸取試劑并嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時，*個孔與zui后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的 “預孵育”時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。而且，洗滌不充分將影響試驗結果。
3. 試劑盒保存：部分試劑保存于-20℃，部分試劑保存于2-8℃，具體以標簽上的標示為準。
4. 濃洗滌液會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。
5. 剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質，此為正常現象，不會對實驗結果造成任何影響。
6. 中、英文說明書可能會有不*之處，請以英文說明書為準。
7. 所有的樣品都應管理好，按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。
8. 有效期：6個月
三．“AECA,小鼠抗內皮細胞抗體ELISA試劑盒”樣品收集、處理及保存
1）.細胞培養上清：
適用于檢測體外培養的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2）細胞：
用PBS反復洗滌細胞3次，調整細胞濃度達到104-106/ml 左右，通過反復凍融，使細胞破壞并放出細胞內成份，或者細胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3）血清：
在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4）血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
5）體液：
包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6.）組織標本：
切取組織標本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：
如果樣品不能立即檢測，應將其分裝，-70 ℃保存，避免反復冷凍。保存過程中如出現沉淀，應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
四．操作步驟
1）取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置30分鐘。
2）分組：取出96孔板，根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數，把剩余的板條繼續冷藏處理。分別設標準品組（6個濃度）、空白孔、待測樣品組。
3）標準品的稀釋：準備小試管6 只，依次編好號碼，先在各小試管中加入標準品稀釋液100ul，然后取原濃度標準品100ul加入一只已編好號的試管中，充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中，充分混勻；再在該試管中取100ul加入第三只試管中，充分混勻；再在該試管中取100ul 加入第四只試管中，充分混勻；再在該試管中取100ul加入第五只試管中，充分混勻；然后在該試管中取100ul，棄掉。第六只試管作為0 號標準品。
注：為減少實驗誤差，保證準確性，建議設置復孔。
4）加樣：依照標準品的順序分別加入50ul的標準品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入50ul的蒸餾水；其余微孔中先加樣品40ul然后再加生物素標記的抗體10ul。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
5）溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
6）洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒棄去，如此重復5 次，拍干。
7）加酶標溶液：標準品組、待測樣本組各孔中加入50ul的酶標溶液（空白對照孔除外）。
8）溫育：酶標板用封板紙密封后，放入濕盒內于37℃恒溫孵育1小時。
9）洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置15-30s，充分清洗酶標板5次，用吸水紙*拍干。
10）顯色：各孔加入顯色劑A液50ul后，再加入顯色劑B液50ul。
11）終止：25-37℃下避光反應10-15分鐘，加入50ul終止液。
12）讀板：在450nm波長讀取各孔的OD值。
注：讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡，讀板時間控制在終止反應后的30分鐘內，以免影響準確性。
五．ELISA試劑盒的優點體現
·特異性高：進行了廣泛的非特異性排查，避免了由于交叉反應和干擾導致的實驗數據誤差。 
·精 度 高：通過加標回收率和線性稀釋實驗，確保樣本值的準確性，精確度高于同類產品（較低的CV%）。 
·重復性好：lot-to-lot檢測確保zui小的批間差異。 
·可靠性強：經優化的試劑盒組分可有效的zuzhi假陽性和假陰性試驗結果。 
·標準曲線：在保證精準數據的前提下提供較寬的檢測范圍，以滿足需求。 
·價格低廉：*RD試劑，國內分裝配置，大大減少了客戶因為價格高而必須購買國產試劑盒的顧慮。 

六．注意事項
1）實驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2）加樣：加樣時，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大，否則將會導致不同的預孵育時間，從而影響實驗的準確性以及重復性。
3）孵育：嚴格按照說明書上規定的孵育時間和溫度進行。
反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化，如果顏色較深，請提前加入終止液終止反應。
4）建議實驗前預測樣品含量，如樣品濃度過高，應對樣品進行稀釋，計算結果時乘以相應的稀釋倍數。
5）建議使用本試劑盒時先做預實驗（即先做標準曲線，試用幾個標本），如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經銷商，如果因運輸過程導致試劑盒失效，可要求調換，但概不承擔產品本身以外的任何損失。
七．“”保存條件及有效期
1.試劑盒保存：2-8℃
2.有效期：6個月
八．訂貨說明
1）賣方確保所訂產品與目錄技術指標保持*；
2）為了確保買方產品在運輸中的質量，對有特殊要求的低溫產品予以濕冰運輸。
3）收到貨物后如出現質量問題，買方需在收到貨物一個月內向賣方提出書面異議。買方逾期不提出異議，視為貨物符合其要求，賣方不付任何責任。
4）出現質量以外的問題，如破損等，買方應在收貨后一個周內提出。買方未按時提出異議，視為該產品合格。
本公司對所有售出的產品保證質量，并提供良好的售后服務，有關產品質量的投訴，請在收到貨物的32天內以書面形式提出，并向我公司技術人員提供相應的材料，我們會及時派人解決。所有形式的賠償或退換僅限于產品本身，不涉及其他間接內容。凡購買本公司任意款elisa試劑盒，均可享受免費代測服務，并提供技術指導。