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2025-08-26
一、血清沉淀物的成因1.脂蛋白變性胎牛血清中的脂蛋白在溫度驟變(如直接-20℃轉(zhuǎn)37℃解凍)時易發(fā)生變性聚集,形成白色絮狀物。研究表明,此類沉淀占解凍后沉淀總量的40%-60%。2.纖維蛋白析出低溫采集的血清殘留纖維蛋白原,解凍時轉(zhuǎn)化為纖維蛋白,形成肉眼可見的1-2mm絮狀物。該現(xiàn)象在未完-全過濾的血清批次中尤為明顯。3.磷酸鈣結(jié)晶37℃環(huán)境下磷酸鈣溶解度降低,產(chǎn)生云霧狀沉淀,顯微鏡下呈現(xiàn)布朗運動的黑點,易被誤判為微生物污染。操作因素反復(fù)凍融導(dǎo)致脂質(zhì)聚集熱滅活(56℃以上)引...2025-08-19
一、核心定義干細(xì)胞療法是利用具有自我更新與多向分化潛能?的原始細(xì)胞,通過再生修復(fù)機制干預(yù)疾病的前沿技術(shù)。其核心在于:自我復(fù)制:無限增殖產(chǎn)生相同子代細(xì)胞;分化能力:在特定條件下轉(zhuǎn)化為神經(jīng)細(xì)胞、心肌細(xì)胞等功能細(xì)胞。二、來源與類型干細(xì)胞主要來源于三類途徑:胚胎干細(xì)胞取自早期胚胎,分化潛能最-強,但存在倫理限制。成體干細(xì)胞常見來源:胎盤、臍帶、骨髓、脂肪、牙髓等組織?;代表類型:間充質(zhì)干細(xì)胞(免疫原性低,可異體使用)。誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS)通過體細(xì)胞重編程技術(shù)獲得,規(guī)避倫理問題。三...2025-08-13
一、物種匹配度(相似性原則)1.進(jìn)化相近物種優(yōu)先:非人靈長類(猴等)用于神經(jīng)疾病、HIV研究(與人類基因相似度>93%)豬用于心血管或器官-移植研究(心臟結(jié)構(gòu)與人類吻合度89%)嚙齒類(小鼠/大鼠)用于基礎(chǔ)研究(繁殖快、成本低)2.特殊功能匹配:兔(刺激性排卵)→避孕藥研究豚鼠(易過敏)→化妝品測試大鼠(無膽囊)→膽汁收集實驗二、個體生理狀態(tài)控制三、標(biāo)準(zhǔn)化要求1.遺傳背景:近交系(如C57BL/6小鼠)需提供譜系證明基因編輯動物提交三代穩(wěn)定性數(shù)據(jù)2.微生物控制:SPF級(無特...2025-08-05
霉菌是一類絲狀真菌,廣泛存在于潮濕、溫暖環(huán)境,通過菌絲體形成絨毛狀或絮狀菌落,依靠孢子繁殖傳播。它既能分解有機物維持生態(tài)平衡,也可能引發(fā)霉變、腐敗甚至人體感染。一、樣本采集與處理問題1.采樣代表性不足固態(tài)樣品(如谷物、堅果)因霉菌分布不均易漏檢,需采用五點采樣法并研磨至粒徑<2mm以提高均質(zhì)性。關(guān)鍵措施:干燥樣品優(yōu)先選用耐高滲培養(yǎng)基(如DG18)同步培養(yǎng)。2.假陰性風(fēng)險樣本放置>4小時可致孢子活性顯著下降;臨床樣本中雖有癥狀但檢出陰性,可能因早期感染菌量不足、采樣不當(dāng)或檢測誤...2025-07-29
一、轉(zhuǎn)染基礎(chǔ)概念細(xì)胞轉(zhuǎn)染是將外源核酸(DNA/RNA)導(dǎo)入真核細(xì)胞的技術(shù),分為瞬時轉(zhuǎn)染(外源基因短期表達(dá))和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染(基因整合至基因組長期表達(dá))兩類。核心應(yīng)用包括基因功能研究、蛋白表達(dá)及基因治療開發(fā)。二、常用轉(zhuǎn)染方法對比三、標(biāo)準(zhǔn)化操作流程(以脂質(zhì)體法為例)細(xì)胞準(zhǔn)備:接種對數(shù)生長期細(xì)胞,密度達(dá)70%-90%匯合。復(fù)合物制備:無血清培養(yǎng)基稀釋質(zhì)粒DNA與轉(zhuǎn)染試劑(如Lip2000)。室溫靜置15分鐘形成DNA-脂質(zhì)體復(fù)合物。轉(zhuǎn)染執(zhí)行:移除原培養(yǎng)基,加入復(fù)合物輕搖混勻。4-6小時后...2025-07-24
1.定義血漿:抗凝全血離心后獲得的液態(tài)組分,保留纖維蛋白原及全部凝血因子,呈淡黃色。血清:血液自然凝固后析出的透明液體,纖維蛋白原已轉(zhuǎn)化為纖維蛋白凝塊,故不含纖維蛋白原及部分凝血因子。2.核心成分差異3.制備工藝關(guān)鍵點血漿制備:全血+抗凝劑(EDTA/肝素)→離心分離禁止凝固,離心條件:4℃、2000g×15分鐘血清制備:全血無抗凝劑→37℃靜置30-60分鐘(凝血激活)→離心分離必須充分凝固,離心條件:室溫、3000g×10分鐘4.功能與應(yīng)用場景血漿功能:運輸營養(yǎng)物質(zhì)、維持...2025-07-17
ELISA試劑盒作為實驗室常用檢測工具,其穩(wěn)定性直接影響實驗結(jié)果準(zhǔn)確性。了解變質(zhì)原因有助于規(guī)范存儲和使用流程。一、主要變質(zhì)原因1.儲存條件不當(dāng)溫度波動:酶標(biāo)抗體等組分需2-8℃保存,反復(fù)凍融會導(dǎo)致蛋白變性光照影響:HRP等光敏感組分暴露于強光下會失活濕度失控:干燥劑失效會導(dǎo)致微孔板受潮2.運輸過程風(fēng)險冷鏈斷裂(8℃持續(xù)2小時即可能影響效價)劇烈震動導(dǎo)致包裝破損或組分混合3.操作污染重復(fù)使用移液槍頭導(dǎo)致交叉污染未冷藏的顯色液被微生物污染4.過期使用抗體效價隨時間自然衰減(通常保...